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4×Hifair® V nCov II Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit

13118.jpg

产品信息


产品名称

产品编号

规格

4×Hifair® V nCov II Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit

13118ES60

100 T

4×Hifair® V nCov II Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit

13118ES80

1000 T

4×Hifair® V nCov II Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit

13118ES92

10000 T


产品描述


4×Hifair® V nCov II Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit是以RNA为模板进行多重定量PCR反应的试剂盒。在实验的过程中,逆转录和定量PCR在同一反应管中进行,简化了实验操作,降低了污染的风险。

本试剂盒利用耐热Hifair® V Reverse Transcriptase高效合成第一链cDNA,并利用UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase进行定量扩增。本试剂盒主要包含优化的MP Buffer,Enzymes Mix等,缓冲液中已含有Mg2+和dNTP等,并添加了有效抑制非特异性PCR扩增的因子和提升多重qPCR反应扩增效率的因子,能够保证引物扩增效率的同时,进行多达四重的反应。


产品组分


组分编号

组分名称

产品编号/规格

13118ES60 (100 T)

13118ES80 (1000 T)

13118ES92 (10000 T)

13118-A

4×Hifair® V MP Buffer

600 μL

6 mL

60 mL

13118-B

Hifair® V Enzyme Mix

100 μL

1 mL

10 mL

13118-C

RNase Free H2O

1.2 mL

12 mL

120 mL

【注】a) 4×Hifair® V MP Buffer为Multiplex One Step RT-qPCR Probe Buffer的简写。

b) 不含Rox reference dye。如需,推荐使用货号10200ES产品。

c) Hifair® V Enzyme Mix主要包含Hifair® V Reverse Transcriptase、RNase inhibitor和UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase。


适用机型


ABI系列:ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne, StepOne Plus; 7500, 7500 Fast, ViiA7, QuantStudio 3 and 5, QuantStudio 6, 7, 12k Flex;

Bio-Rad系列:Bio-Rad CFX96, CFX384, iCycler iQ, iQ5, MyiQ, MiniOpticon, Opticon, Opticon 2, Chromo4;

Roche系列:Roche Applied Science LightCycler 480, LightCycler 2.0; Lightcycler 96;

其他系列:Stratagene MX3000P, MX3005P, MX4000P;

Eppendorf Mastercycler ep realplex, realplex 2 s;

Qiagen Corbett Rotor-Gene Q, Rotor-Gene 3000, Rotor-Gene 6000;

Thermo Scientific PikoReal Cycler; Cepheid SmartCycler; Illumina Eco qPCR.


运输与保存方式


冰袋运输。-20℃保存,有效期1年。本品避免反复冻融。建议分装保存。


注意事项


1. 实验过程中请使用RNase free耗材。

2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。


反应体系(以25 μL体系为例说明)


组分

体积(μL)

4×Hifair® V MP Buffer

6

Hifair® V Enzyme Mix

1

Primer/Probe Mix (10 μM)

1

模板RNA

1 - 14

RNase Free H2O

To 25

】:使用前务必充分混匀,避免剧烈震荡产生过多气泡。

a) 引物和探针浓度:Primer/Probe Mix中包含多对引物和探针,通常每条引物终浓度为0.4 μM,也可以根据情况在0.1-1.0 μM间进行调整;每条探针的浓度可根据具体情况在50-300 nM间调整。

b) 模板稀释:qPCR灵敏度极高,建议将模板进行稀释使用,控制Ct值在在20-35之间适宜。

c) 反应体系:推荐使用25 μL或50 μL,以保证目的基因扩增的有效性和重复性。

d) 体系配制:请于超净工作台内配制,并使用无核酸酶残留的枪头、反应管;推荐使用带滤芯的枪头。避免交叉污染和气溶胶污染。


标准扩增程序



反应阶段

温度

时间

循环数

1

逆转录

50℃a

10 min

1

2

预变性

95℃

5 min

1

3

扩增反应

95℃

15 sec

45

60℃b

30 secc

【注】

a) 逆转录:42℃或者50℃均可,时间10-15 min。

b) 扩增反应扩增反应温度根据设计的引物Tm值进行调整。CDC 官方推荐的 ORF1abN引物,退火温度建议≥60℃。

c) 荧光信号采集:不同的qPCR检测仪器所需的荧光信号采集时间不同,请根据最短时间限制进行设置。

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产品名称

货号

规格

价格(元)

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13114ES60

100T

3062.00

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10KU

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10303ES76

500U

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10128ES72

250μL

253.00

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10128ES80

1mL

853.00

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