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HB190813

Murine RNase Inhibitor (200 U/µL, Glycerol-free)


产品信息


产品名称

产品编号

规格

Murine RNase Inhibitor (200 U/µL, Glycerol-free)

10703ES05

2 KU

10703ES10

10 KU

10703ES60

100 KU

10703ES70

200 KU


产品描述


RNase抑制剂(RNase inhibitor)是存在于人的胎盘中一种特异性核糖核酸酶(RNase)抑制剂,其特异性失活RNase的原理是:与RNase以非共价键结合形成复合体,造成RNase失活。

本产品是以可溶形式在大肠杆菌中表达纯化的重组鼠源RNase抑制剂,能够广泛抑制各种类型RNase(RNase A, B, C)。经RT-PCR、RT-qPCR检验,本产品能与Hifair® V Reverse Transcriptase(货号:11300ES)及各种DNA Polymerase兼容。与人源RNase inhibitor相比,本产品不含人源蛋白中的两个对氧化非常敏感的半胱氨酸,因而具有更高的抗氧化活性。同时,更加适合于对高DTT敏感性实验(如qPCR等)。

本产品可用于cDNA第一链合成、多核糖体的分离(Polysome isolation)、体外转录和体外无细胞翻译系统等实验。

本产品不含甘油,专门用于冻干试剂的配置。


运输与保存方法


冰袋运输。产品4-8 ℃保存,有效期1年。


活性定义


抑制5 ng RNase A活性的50%所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。RNase A活性通过水解Cyclic 2',3'-CMP生成3'-CMP定量求得。


质量控制


核酸外切酶残留检测:200 U本品和0.6 μg λ-Hind III在74℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。

核酸内切酶残留检测:200 U本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在74℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。

大肠杆菌残留DNA残留检测:50 μL体系中,加入200 U本品,以ddH2O为模板,扩增E.coli 16s rDNA基因。35个循环后进行1%琼脂糖凝胶电泳,EB染色,无扩增条带。


应用实例(逆转录实验)


1. 在RNase free离心管中配制如下混合液

组分

体积(μL)

RNase free ddH2O

to 20

5× Hifair® V Buffer

4

Oligo (dT)18 (50 μM)

1

dNTP Mix (10 mM each)

1

Murine RNase Inhibitor (200 U/μL)

0.2

Hifair® V Reverse Transcriptase (200 U/μL)

1

模板RNA

Total RNA:1 ng-5 μg

2. 轻轻混匀。

3. 42℃ 15-30 min,85℃ 5 min。

4. 产物于-20℃保存。


注意事项


1. 本品抑制RNase活性的pH值范围较广,在pH 7~8时表现最大活性。

2. 避免起泡或剧烈搅拌、涡旋等操作,以防止本品失活。

3. 本品不抑制RNase H活性。

4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。


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